第二代试管婴儿ICSI不受精的主要因素分为精子和卵子两个方面，且现有的研究表明精子因素为主要因素。卵子原因导致的不受精包括不成熟卵子、异常卵子、退化卵子等，精子原因导致的ICSI受精失败包括精子形态不佳（如圆头精子症）、缺乏活化卵子因子等等。
二代试管婴儿为什么精卵不结合
第二代试管婴儿，专业名称叫卵母细胞胞浆内单精子显微注射，英文缩写为ICSI。主要是针对严重的男性不育，如严重的少、弱、畸形精子症以及睾丸或附睾取出的精子以及常规的体外受精，也就是第一代试管婴儿(英文缩写IVF)受精失败而采用的技术。理论上，通过单精子注射可完成100%受精，但报道仍有30%的卵子不能发生正常受精，1-3%的患者会发生完全受精失败。
受精失败的原因目前仍然不是非常清楚，一般认为与受精子和卵子的因素，如精卵自身的缺陷以及由此导致的激活障碍等有关，同时因为ICSI本身就是一种侵入性操作，其操作技术本身也会影响受精结果。具体总结如下：
1、卵子因素
如卵子不成熟，老化或结构功能异常，卵子自身的遗传缺陷等。
2、精子因素
如严重的畸形精子症，死精子症，精子核DNA异常等。尽管在ICSI技术下可以挑选到外观接近正常的精子，但是这些精子很可能存在超微结构的异常，而且这些细微结构异常的精子在严重畸形精子症的精液中所占的比例又非常高，在常规的低倍显微镜下挑到他们的几率会更高，从而发生卵子激活失败。还有些虽然精子的活力，形态接近正常或正常，但ICSI时也会不受精，这可能与精子自身功能的缺陷有关，如缺乏激活卵子的因子等。
3、精卵激活障碍
ICSI时卵子的激活由注射入的精子或机械的刺激或两者共同完成，简单来讲，精子注射入卵子后要引发一系列的化学反应，如果其中的一个步骤发生了问题，整个反应链就断了，也就发生了受精失败。